Sản Phẩm Mới

Tác động của một phức hợp chất chống oxy hóa bổ sung đối với sự phân mảnh DNA tinh trùng ở đàn ông vô sinh

 

TÓM TẮT
 
Trong phương pháp điều trị hỗ trợ sinh sản không còn có đủ thời gian để đạt được tinh trùng tinh trùng cần thiết, chúng ta phải tìm thấy những tinh trùng tốt nhất. Trong số các thông số khác nhau được nghiên cứu cho đến gần đây, chẳng hạn như mật độ, khả năng vận động và hình thái, tỷ lệ thành công khác nhau đã được quan sát ngay cả với tương tự dấu hiệu chất lượng tinh trùng kinh điển. Do đó, nghiên cứu đã được phát triển để tìm ra dấu hiệu mới của chất lượng tinh trùng. Một trong số đó là tinh trùng DNA phân mảnh. Một mối tương quan chặt chẽ giữa tinh trùng phân mảnh DNA cao và kết quả sinh sản kém. Theo truyền thống, và hoàn toàn theo kinh nghiệm, vitamin C và E đã được sử dụng trong một nỗ lực để cải thiện chất lượng tinh trùng .
 
Mối quan hệ giữa sự phân mảnh DNA tinh trùng và sự dư thừa của các gốc tự do và / hoặc chất chống oxy hóa thâm hụt nam giới vô sinh (ininfertile) đã nêu lên câu hỏi liệu việc bổ sung với các chất chống oxy hóa có thể cải thiện kết quả sinh sản của mình bằng cách giảm DNA tinh trùng phân mảnh. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đánh giá tác động của phức  hợp chất chống oxy hóa ( Androferti ®/ Oximum®, Laboratorios Q- Pharma) bổ sung cho nam giới vô sinh trong DNA phân mảnh tinh trùng của họ.

 

Từ khóa: Gốc tự do (ROS). Tinh trùng . Vô sinh. Chất chống oxy hóa . Tinh trùng phân mảnh DNA. công nghệ sinh sản hỗ trợ (ART) .
 
Tác động của một phức hợp chất chống oxy hóa 
bổ sung đối với 
sự phân mảnh DNA tinh trùng ở đàn ông vô sinh
 
Carlos Balmori Boticario, Cristina Areces Vina, AlbertoPacheco Castro, Marta San Celestino Carchenilla y Juan Antonio Garcia Velasco
Instituto Valenciano de Infertilidad (IVI). Madrid. España.
 
 
TÓM TẮT
 
Tác động của một phức hợp chất chống oxy hóa bổ trợ trên phân mảnh DNA của tinh trùng ở người đàn ông vô sinh.
 
Trong phương pháp điều trị hỗ trợ sinh sản không còn có đủ thời gian để đạt được tinh trùng tinh trùng cần thiết, chúng ta phải tìm thấy những tinh trùng tốt nhất. Trong số các thông số khác nhau được nghiên cứu cho đến gần đây, chẳng hạn như mật độ, khả năng vận động và hình thái, tỷ lệ thành công khác nhau đã được quan sát ngay cả với tương tự dấu hiệu chất lượng tinh trùng kinh điển. Do đó, nghiên cứu đã được phát triển để tìm ra dấu hiệu mới của chất lượng tinh trùng. Một trong số đó là tinh trùng DNA phân mảnh. Một mối tương quan chặt chẽ giữa tinh trùng phân mảnh DNA cao và kết quả sinh sản kém. Theo truyền thống, và hoàn toàn theo kinh nghiệm, vitamin C và E đã được sử dụng trong một nỗ lực để cải thiện chất lượng tinh trùng .
 
Mối quan hệ giữa sự phân mảnh DNA tinh trùng và sự dư thừa của các gốc tự do và / hoặc chất chống oxy hóa thâm hụt nam giới vô sinh (ininfertile) đã nêu lên câu hỏi liệu việc bổ sung với các chất chống oxy hóa có thể cải thiện kết quả sinh sản của mình bằng cách giảm DNA tinh trùng phân mảnh. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đánh giá tác động của phức  hợp chất chống oxy hóa ( Androferti ®/ Oximum®, Laboratorios Q- Pharma) bổ sung cho nam giới vô sinh trong DNA phân mảnh tinh trùng của họ.
 
Từ khóa: Gốc tự do (ROS). Tinh trùng . Vô sinh. Chất chống oxy hóa . Tinh trùng phân mảnh DNA. công nghệ sinh sản hỗ trợ (ART) .

GIỚI THIỆU
 
Tỷ lệ trường hợp vô sinh thay đổi tùy theo dân số nghiên cứu, nhưng tỷ lệ (được hiểu là tổng số các cặp vợ chồng vô sinh so với tổng số các cặp vợ chồng cùng một lúc và nơi) được ước tính là 15%. Tại Tây Ban Nha, hiện nay có một số 900.000 cặp vợ chồng vô sinh, trong đó có khoảng một nửa đến trung tâm sinh sản lần tìm cách khắc phục của họ vấn đề. Trong 20-30% các cặp vợ chồng vô sinh, nguyên nhân chính là nam tính, hiện diện thay đổi chức năng tinh hoàn, tắt nghẽn ống dẫn tinh, bệnh lý tuyến tiền liệt và những thay đổi trong xuất tinh hoặc cương cứng1.
 
Việc đánh giá khả năng sinh sản nam cổ điển dựa trên 3 thông số cơ bản của tinh dịch đồ (spermiogram) – mật độ (tập trung), khả năng vận động và hình thái học là phổ biến và được sử dụng trong hơn 50 năm 2 đã trở thành không đủ để tìm kiếm giải pháp cho các vấn đề vô sinh nam. Bệnh nhân có phân tích tinh dịch nằm trong các thông số bình thường nhưng, tuy nhiên, có vấn đề về sinh sản hoặc bệnh nhân trong chương trình thụ tinh (fertilisationprograms) nhân tạo với tinh dịch đồ và kỹ thuật tương tự, đã loại trừ  các yếu tố nữ, không đạt được kết quả tương tự. Tất cả điều này dẫn chúng ta phải xem xét rằng khác các yếu tố ảnh hưởng đến vô sinh nam.
 
Trong số những yếu tố này, ảnh hưởng của căng thẳng oxy hóa có vẻ hơn và rõ ràng hơn3. Loài gốc ôxy phản ứng (ROS) là các gốc tự do cụ thể ảnh hưởng đến stress oxy hóa tế bào. Việc tìm kiếm một điểm đánh dấu cho sự mất cân bằng này mà stress do oxy hóa hiện đã dẫn đến việc mức độ tinh trùng DNA phân mảnh dấu hiệu chính4. Tăng ROS dẫn đến tổn hại DNA của tinh trùng 5. Các nguồn sản xuất ROS ngoại sinh rất nhiều: Các chất hóa học, tiếp xúc với nhiệt độ cao, sử dụng rượu và thuốc lá, và tập thể dục cường độ cao. Trong số nguồn nội sinh, chúng ta thấy bạch cầu trinh trùng (leukocytospermia) và sốt, viêm và những căng thẳng6-8. Hầu hết các quá trình này gây ra dư thừa ROS và các khuyết tật trong các hệ thống chống oxy hóa; do đó, điều chỉnh các yếu tố có hại trước đó đã đề cập và quản lýchất chống oxy hóa sẽ được hưởng lợi sinh sản nam giới9.
 
Trong nghiên cứu này, chúng tôi đánh giá tính hữu dụng của một hợp chất chống oxy hóa (Androferti®/Oximum ®, Laboratorios Q- Pharma) trên DNA phân mảnh của tinh trùng.
 
TÀI LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
 
Giữa tháng 10 năm 2008 và tháng 7 năm 2009, chúng tôi đã chọn 101 nam giới mà đã đến phòng khám của chúng tôi lại với nhau với các đối tác của họ cho phương pháp điều trị khả năng sinh sản. Tuổi nam trung bình là 39 năm. Các tiêu chí bao gồm như sau: các cặp vợ chồng có thất bại lặp đi lặp lại trong các kỹ thuật hỗ trợ sinh sản, tinh trùng ít (oligospermia) (< 10 triệu/ml) hoặc tinh trùng yếu (astenospermia) (< 50% a + b) và phân mảnh DNA tinh trùng mức > 20%, được đo bằng cách sử dụng phương pháp Tunel (thiết bị đầu cuối deoxynucleotidyl transferase qua trung gian deoxyuridine triphosphate ghi nhãn ghi nấc đầu cuối).
 
Nghiên cứu này được sự chấp thuận của Ủy ban đạo đức và Ban quản lý của trung tâm, nơi thực hiện.
 
Chúng tôi đề nghị rằng tất cả họ đều phải dùng 2 gói Androferti ®/Oximum ®, có thành phần cho mỗi gói là L carnitine 500 mg, coenzyme Q-10 10 mg, 5 mg kẽm, axit folic 100 pg, selen 25 pg, vitamin B12 0,50 pg, vitamin C 30 mg và 5 mg vitamin E. Chúng tôi cũng khuyên họ đến cách sống và thực phẩm. Đánh giá được thực hiện với tinh dịch phân tích và đánh giá DNA tinh trùng phân mảnh sau 70 ngày điều trị. Phá vỡ DNA tinh trùng đã được nghiên cứu với kỹ thuật Tunel sử dụng kit tại chỗ phát hiện tế bào chết , huỳnh quang (Roche , Mannheim, Đức ). Điều này được dựa trên kết hợp với các thành phần huỳnh quang deoxyuridine được đánh dấu (nhờ enzyme TDT) tại các điểm vỡ đơn lẻ (single) hay sợi đôi DNA tại 3'- OH cuối chuỗi bị ảnh hưởng.
 
Trong các thông số phân tích tinh dịch, chúng tôi nghiên cứu các giá trị bao gồm: sự tập trung, tổng nhu độngtiến tới (Total Progressive Motility - TPM) tinh trùng và hình thái. Có 37 bệnh nhân được tuyển dụng trong giai đoạn nghiên cứu sơ bộ, trong phần còn lại của bệnh nhân đã có 8 thu được mang thai tự phát trước khi kết thúc giai đoạn kiểm soát, và phần còn lại không đến tham khảo ý kiến ​​tại thời điểm chỉ định. Tóm tắt các dữ liệu thu được có thể được nhìn thấy trong bảng 1.
 
BẢNG 1. Tóm tắt dữ liệu phân tích tinh dịch
 
 
Mật độ
Di chuyển A
Di chuyển B
Di chuyển C
Di chuyển D
TPM
Hình thái
0 ngày
11,3
0
21
9
66
5,6
1,5
70 ngày
11
0
25
11
60
7,8
2
 
TPM: di chuyển tiến tới toàn bộ

Trong bảng phân phối dữ liệu, sau khi đánh giá thực hiện tại ngày thứ 70, không có khác biệt đáng kể được quan sát. Tuy nhiên, dữ liệu phân tán được nâng lên ở hầu hết tất cả các biến. Nói chung, bằng cách sử dụng kết quả thu được cho các trung bình và tứ phân vị là tốt hơn cho các giá trị trung bình và sự phân tán của dữ liệu. Về hình thái, và do nhảy về quy mô, họ có thể chỉ được sử dụng trong phân tích phương sai (Analysis of Variance – ANOVA).
 
Trong phân tích mô tả, một sự thay đổi của đường cong cho isindeed ngay quan sát trong trường hợp loại B tinh trùng , và theo hướng bên trái cho loại D. Điều này cho thấy sự cải thiện khả năng vận động (Hình 1 và 2).
 
 
 
Hình 1. Phân tích - mô tả. Tinh trùng Loại B, mức độ cơ bản và sau điều trị.
 

Hình 2. Phân tích - mô tả. Tinh trùng Loại D, mức độ cơ bản và sau điều trị.
 
Các kết quả của các mối tương quan là không thuyết phục, vì vậy các thành phần thừa và chính phân tích không thể được áp dụng (Hình 3) .
 
 
 
Hình 3. Mối tương quan: triệu / ml; A; B; C; D; TPM .
 
Các kết quả phân tích của phương sai cho thấy không có bất kỳ sự khác biệt đáng kể. Tuy nhiên, cho rằng ANOVA là phân phối phụ thuộc, nó không được khuyến cáo, chỉ có thử nghiệm Wilcoxon (không tham số). Mặc dù những kết luận tương tự về hình thái, họ không cho nồng độ các biến và TPM (Hình 4 và 5).
 
 
 
 

Hình 4. ANOVA một chiều: mật độ, mật độ (nhóm chứng).
Hình 5. ANOVA một chiều: TMP; TMP nhóm chứng).
 
Mặc dù các dữ liệu xuất hiện không đáng kể do sự phân tán lớn và hạn chế số mẫu, có vẻ như là một xu hướng chung nhất định đối với cải thiện các thông số. Điều này có thể được nhìn thấy đồ họa trong các bài thuyết trình của bệnh nhân tiến hóa (Hình 6 và 7).
 

Hình 6. TPM phát triển cá nhân của mỗi bệnh nhân. Sau 70 ngày.
 

Hình 7. Sự tiến triển mật độ cá nhân của mỗi bệnh nhân. Sau 70 ngày.

Đối với các dữ liệu phân mảnh DNA với , phân phối xác suất cho các dữ liệu không phải là bước đầu thực hiện bình thường. Tuy nhiên, theo đánh giá nhóm chứng, nó có thể được quan sát rằng có một xu hướng hướng tới một phân bố bình thường của dữ liệu, đó là có ý nghĩa về thống kê (Hình 8).
 
 
 
Hình 8. Phân tích mô tả các giá trị phân mảnh DNA.
 
Đối với các giá trị trung tâm dữ liệu và phân tán, nó thường là tốt hơn để sử dụng các kết quả thu được chomức trung bình và tứ phân vị lúc bắt đầu nghiên cứu và trung bình và độ lệch chuẩn sau khi đánh giá kiểm soát.
 
Để xem sự khác biệt tồn tại trong các phương tiện là có ý nghĩa thống kê, chúng ta cần xem điểm đề cập đếntrong ANOVA. Các số liệu cho phân mảnh DNA biến đổi từ 31,7 ± ​​9,5 trước khi điều trị và 22,4 ± 19,1 sau khi điều trị, với trị giá P (Wilcoxon) = 0,004.
 
Trong nghiên cứu ANOVA, dữ liệu chứng minh rằng có sự khác biệt đáng kể giữa các giá trị tại khởi đầu nghiên cứu và những giá trị của đánh giá nhóm chứng (Bảng 2).
 

aDựa trên phạm vi tích cực.
bKiểm tra ký hạng Wilcoxon .

THẢO LUẬN
 
Trong thời đại ngày nay, sử dụng chất chống oxy hóa đã được biết theo kinh nghiệm để cải thiện chất lượng tinh trùng, trong một số trường hợp; tuy nhiên, chính xác những gì mà nam giới có thể hưởng lợi từ việc sử dụng các hợp chất này là không biết đầy đủ10. Cơ chế của stress oxy hóa đang trở thành được biết đến rõ hơn và, do đó, như vậy là phản ứng với nó là chủ trương phương pháp điều trị cho việc kiểm soát sự mất cân bằng từ nó 11.
 
Trong số những tác hại của sự mất cân bằng do stress oxy hóa là sự phân mảnh chuỗi DNA của tinh trùng, trên tất cả các phân mảnh được sản xuất sau sinh tinh là trong mào tinh và ống sinh tinh12. Tinh trùng DNA phân mảnh có thể được dịch ra thất bại cấy, số thay đổi phát triển phôi hay làm tăng xảy thai13. Vì vậy, bất kỳ điều trị hoặc phong cách sống nhằm giảm DNA phân mảnh của tinh trùng sẽ được phản ánh trong tỷ lệ sinh14 lớn hơn.Có vẻ như rõ ràng rằng việc sử dụng chất chống oxy hóa có lợi trong chỉnh sửa những khuyết tật ADN của tinh trùng15.
 
Việc sử dụng các chất như vitamin C và E, kẽm, axit folic, selen, coenzyme Q-10 và L-carnitine đã cho thấy hiệu quả của chúng trong các nghiên cứu khác nhau, một số sử dụng riêng lẻ từng thành phần và những người khác sử dụng kết hợp, nhưng chưa bao giờ trong một phức hợp kết hợp của tất cả các thành phần này lại với nhau16-18.
 
Tổng thời gian giai đoạn với sinh tinh là 65-70 ngày19. Do đó, việc sử dụng chúng tại mức độ tinh hoàn trong thời gian này sẽ là tối ưu, nhưng các tinh trùng sẽ không có những người mà chúng ta có được trong lần xuất tinh ở tháng thứ 2. Tinh trùng mà chúng tôi đánh giá trong 70 ngày là tinh trùng ngoài tinh hoán đang được trưởng thành, đủ khả năng thụ thai, lưu trữ hoặc tập trung ở ống dẫn tinh, nhất là trong mào tinh hoàn20. Do đó, nếu điều trị đã được cải thiện tinh trùng phân mảnh DNA trong khu vực này, sử dụng nó trong một thời gian dài hơn (khoảng 6 tháng) sẽ làm cho nó có thể để đánh giá các điểm đến mà chỉ số phân mảnh DNA có thể được cải thiện trong toàn bộ quá trình : từ sinh tinh trong tinh hoàn đến xuất tinh tinh trùng , đi qua thông qua mào tinh capacitation. Thời điểm đó là mục tiêu của việc tiếp tục nghiên cứu.
 
Cần chỉ ra rằng, mặc dù mẫu nghiên cứu là không lớn và có khá nhiều phân tán dữ liệu liên quan đến các thông số phân tích tinh trùng trong các dữ liệu sơ bộ với, nhưng điều thực sự thú vị là cả hai TPM và nồng độ tăng trong 70 ngày, cho thấy điều chúng tôi đã nói về tinh trùng ngoài tinh hoàn, như đã đề cập trước đó. Nếu chúng ta phân tích bệnh nhân sau ngày nữa đã trôi qua, chúng tôi cũng sẽ đánh giá hiệu quả của việc điều trị trên mật độ và TPM từ tế bào mầm trong tinh hoàn đến tinh trùng xuất tinh.
 
Chúng tôi sử dụng kỹ thuật Tunel để đo sự phân mảnh DNA tinh trùng bởi vì chúng tôi cảm thấy rằng nó  chính xác hơn các kỹ thuật khác, nó không phụ thuộc vào người quan sát, đo lường tổn hại thực sự và sở hữu giá trị tiên đoán cao trong hỗ trợ sinh sản. Điểm cắt của chúng tôi là để xem xét bất thường bất kỳ mẫu phân mảnh > 20%.
 
KẾT LUẬN
 
Kết quả nghiên cứu sơ bộ cho thấy Androferti ®/Oximum ® là phức hợp tốt của yếu tố thiết yếu yêu cầu trong quá trình hình thành tinh trùng và trưởng thành, cũng như trong việc duy trì của nó chất lượng cho đến khi xuất tinh. Cải thiện tinh trùng DNA phân mảnh là rất quan trọng, theo tất cả nghiên cứu hiện nay, để đạt được tỷ lệ thành công hơn trong hỗ trợ sinh sản. Do đó, điều trị với một sản phẩm đạt được sự cải thiện này, chẳng hạn như nghiên cứu ở đây, có thể có sử dụng rất lớn trong lĩnh vực này.
 
Tiếp tục nghiên cứu sẽ có thể chứng minh liệu Androferti ®/Oximum ® cũng có hiệu quả trong việc cải thiện các thông số khác, chẳng hạn như chất lượng phôi thai, giảm thất bại cấy phôi, và những mục tiêu khác.
 
Tuy nhiên, nghiên cứu ngẫu nhiên cũng được thiết kế trên tất cả các loại chất cần thiết để cung cấp sự ủng hộ khoa học cho những gì thực hành lâm sàng đã chứng minh là một điều trị hữu ích.
 
Tham khảo:
1. Sharlip ID, Jarow JP, Belker AM, L Lipshultz LI, Sigman M, Thomas AJ, etal. Best practice policies for male infertility. Fertil Steril. 2002;77:873-82.
2. MacLeod J, Gold RZ. The male factor in fertility and infertility.II. Spermatozoon counts in 1,000 men of known fertility and in 1,000 cases of infertility marriage. J Urol. 1951;66:436-49.
3. Agarwal A, Ikemoto I, Loughlin KR. Relationship of sperm parameters with levels of reactive oxygen species in semen specimens.J Urol. 1994;152:107-10.
4. Garrido N, Meseguer M, Simón C, Pellicer A, Remohi A. Prooxidative and anti-oxidative imbalance in human semen and its relation with male fertility. Asian J Androl. 2004;6:59-65.
5. Barroso G, Morshedi M, Oehninger S. Analysis ofDNA fragmentation, plasma membrane translocation of phosphatidylserine and oxidative stress in human spermatozoa. Hum Reprod. 2000;15:1338-44.
6. Arabi M, Mosthagi H. Influence of cigarette smoking on spermatozoa via seminal plasma. Andrologia.
2005;37:119-24. 7. Raastand T, Bjoro T, Hallen J. Hormonal responses to high and moderate intensity strength exercise. Eur J Appl Physiol. 2001;82:121-8.
8. Sharma RK, Pasqualotto FF, Nelson DR,Thomas AJ, Agarwal A Jr. The reactiveoxygen species–total antioxidant capacity score is a new measure of oxidative stress to predict male infertility. Hum Reprod. 1999;14:2801-7.
9. Kefer JC, Agarwal A, Sabanegh E. Role of antioxidants in the treatment of male infertility. Int J Urol. 2009;16:449-57.
10. Kumar R, Gautam G, Gupta P.Drug therapy for idiopathic male infertility: rationale versus evidence. J Urol. 2006;176: 1307-12.
11. Tremellen K. Oxidative stress and male infertility-a clinical perspective. Hum Repro Update. 2008;14;243-58.
12. Álvarez JG. Aplicaciones clínicas del estudio de fragmentación del ADN espermático. Rev Int Androl. 2007;5:354-63.
13. Carrell DT, Liu L, Peterson CM, Jones KP, Hatasaka HH, Erickson L, et al. Sperm DNA fragmentation is increased in couples with unexplained recurrent pregnancy loss. Arch Androl. 2003;49:49-55.
14. Kefer JC, Agarwal A, Sabanegh E. Role of antioxidants in the treatment of male infertility. Int J Urol. 2009;16:449-57.
15. Greco E, Iacobelli M, Rienzi L, Ubaldi F, Ferrero S, Tesarik J. Reduction of the incidence of sperm DNA
fragmentation by oral antioxidant treatment. J Androl. 2005;26:349-53.
16. Rolf C, Cooper TG, Yeung CH, Nieschlag E. Antioxidant treatment of patients  with asthenozoospermia or moderate oligoastheozoospermia with high dose vitamin C and E: a randomized,
placebo-controlled, double-blind study. Hum Reprod. 1999;14:1028-33.
17. Young SS, Eskenazi B, Marchetti FM, Block G, Wyrobek AJ. The association of folate, zinc and antioxidant intake with sperm aneuploidy in healthy non-smokin men. Hum Reprod. 2008;23:1014-22.
18. Keskes-Ammar L, Feki-Chakroun N, Rebai T, Sahnoun Z, Ghozzi H, Hammami S, et al. Sperm oxidative stress and the effect of an oral vitamin E and selenium supplementon semen quality in infertile men. Arch Androl. 2003;49:83-94.
19. Clermont Y. The cycle of the seminiferous epithelium in man. Am J Anat. 1999;112:35-51.
20. Arrondo JL, Pomerol LM. Recuerdo anatomofisiológico del testículo y vía seminal. En: Pomerol Monseny JM, Arrondo Arrondo JL. editores. Prácticaandrológica. Barcelona: Ediciones Científicas y Técnicas S.A.; 1994. p. 3-13.
 
 
BS. Do Minh Tu.